在分子實驗室中減少污染的10種方法

在這里，我們討論了控制或最小化分子實驗室污染的十種方法。實驗室家具實驗室按歸屬可分為三類：第一類是從屬于大學或者是由大學代管的實驗室；第二類實驗室屬于國家機構(gòu)，有的甚至是國際機構(gòu)；第三類實驗室直接歸屬于工業(yè)企業(yè)部門，為工業(yè)技術(shù)的開發(fā)與研究服務。實驗臺對于生物、醫(yī)藥、涂料實驗室及潔凈間而言，徹底的清潔和消毒是首先要考慮的功能，這就要求實驗室家具具有易清潔，消毒并能夠較長時間保持潔凈的特點。而普通的鋼制和木制家具則很難滿足這種潔凈度的要求。實驗中央臺可做島形，四周都有走道便于工作人員活動并可以快速接近緊急設備或出口，當實驗室兩側(cè)或兩端有確定的出口時可采用半島形實驗臺，而單間實驗室通常采用靠墻實驗臺在中間留通道。內(nèi)凹形工作臺讓工作人員長時間工作也會舒適，采用此方案，他們工作時可以使腳放在地上或腳位上以保持平衡，挺直身體，同時，人坐在內(nèi)凹形實驗臺邊，也可以為實驗室留出更大的活動空間。

1.實驗室建設

污染的預防始于構(gòu)建或建立PCR實驗室。PCR檢測應至少指定兩個區(qū)域：PCR前和PCR后。應指定一個房間或區(qū)域進行預PCR。理想情況下，該房間應進一步分為兩個區(qū)域：制備PCR主混合物和添加樣品制備/主混合物。

通過使用死空氣罐（DAB）用UV光，可以與樣品中加入單獨制備主混合物。 DAB具有以制備主混合物所需的特殊消耗品和小型設備（離心，渦流管，移液管，提示和管）。

樣品制備可涉及手動或自動提取。樣品制備所需的消耗品和小型設備(小型離心機，渦流管，移液器，吸頭和管等)可以放在臺式，另一個DAB或生物安全柜(BSC)中，具體取決于您正在使用的樣品。該區(qū)域還可用于將樣品添加到PCR主混合物中。

應該有用于存儲盒的專用冰箱/冷凍器,另一個用于存儲樣品。

我們應當建立第二個房間（PCR后）和擴增后一步進行分析。這個室應獨立的PCR前室。腔室后是用于擴增的熱循環(huán)儀和PCR后的器械的任何期望的位置處的PCR分析。理想情況下，DAB用于該區(qū)域，PCR擴增后的任何的操作的開口管所需的步驟中使用。小設備和PCR后要產(chǎn)生所需的消耗品接收DAB（微量離心，渦流泵，吸液管，提示和管）。

2.環(huán)境控制

這兩個區(qū)域(預PCR和后PCR)應該具有獨立的環(huán)境控制，而不是使用常見的管道系統(tǒng)進行空調(diào)。此外，兩個房間都應配備氣鎖門。注意：如果無法為PCR前和PCR后工作建立物理屏障或單獨的房間，應盡一切努力將工作區(qū)域盡可能遠地設置。實驗室技術(shù)人員應將這兩個工作區(qū)視為處于不同的房間。應注意在每個區(qū)域佩戴不同的個人防護裝備(PPE)。

3.單向工作流程

在預PCRPCR之后，分子實驗室的工作流程只應朝著一個方向繼續(xù)進行。PCR主要混合試劑和可能含有PCR模板的樣品只能在PCR預室中制備。

經(jīng)受在含有擴增子后室（所述模板的擴增）管PCR擴增，以及前不應該被打開或引入在任何情況下PCR室。擴增子為模板，進行PCR反應的將來，很容易PCR污染或樣品制備試劑，消耗品或設備。

這意味著，在未經(jīng)徹底凈化的情況下，引入PCR后室的消耗品和PPE(實驗室外套，手套，護目鏡等)不應放回PCR前室。

當從一個房間移動到另一個房間時，實驗室技術(shù)人員必須記住更換PPE。理想的是，后PCR操作的技術(shù)人員不應該返回到預PCR進行工作。如果必須違反單向工作流，則應小心更換PPE。